中成药乃是以中药材作为原料，历经炮制、提取、制剂等一系列工艺加工制作而成的中药制品，有处方固定、剂量准确、使用便捷等诸多优势[1],在临床防治各类疾病方面有着广泛的应用。但中成药成分繁杂、来源渠道多种多样，再加上部分生产企业质量控制水平参差不齐，致使市场上假冒伪劣产品时常出现，影响中成药疗效和危及公众用药安全。构建科学、快速且可靠的中成药真伪判定方法，对保障公众用药安全以及提升行业监管水平有关键的意义[2]。薄层色谱技术作为被《中国药典》收录的经典中药鉴别方法[3],凭借其灵敏度高、特异性强、直观性好以及操作简便等优点，被广泛应用于中药材及中成药的真伪鉴别工作当中。近些年来，研究人员在中兽药、民族药材如肾炎草等多个领域都证实了薄层色谱鉴别技术在真伪判定方面的实用性与可靠性[4]。然而，因为实验条件以及操作细节存在差异，薄层色谱结果容易受到供试品黏性、点样方式、温度湿度以及显色条件等多种因素的影响，可能会出现斑点拖尾、重现性不足等问题，限制了其应用效果。基于此，本研究挑选临床常见的寒喘祖帕颗粒、风寒咳嗽颗粒、齿痛消炎灵颗粒、咽炎片以及金感胶囊等中成药样品，运用薄层色谱技术进行真伪鉴别，并且结合固相萃取前处理以及显色条件优化的方法，对其应用价值展开分析，验证薄层色谱在中成药真伪判定中的有效性与可靠性，为临床合理用药以及药品质量监管提供参考。
1 材料与试剂
1.1 一般资料
本研究共采集临床及市场流通中的多种常见中成药样品，包括寒喘祖帕颗粒、风寒咳嗽颗粒、齿痛消炎灵颗粒、咽炎片、金感胶囊、润肺膏、脑立清丸、蛤蚧定喘丸、小儿七星茶颗粒、小儿豉翘清热颗粒、小建中胶囊、心脑舒通胶囊、消栓通络胶囊、皮肤病血毒丸、感冒清热颗粒、元胡止痛片、通宣理肺丸、尪痹片、小儿热速清口服液、桂龙咳喘宁片、泻青丸、普乐安片、偏瘫复原丸、苍耳子鼻炎胶囊、颈复康颗粒、保胎灵胶囊、复方一枝蒿颗粒、益心酮软胶囊、妇康片、金匮肾气丸、风湿骨痛片、小儿热速清颗粒、芩黄喉症胶囊、天麻头痛片、小儿肺热咳喘颗粒、胃苏颗粒、丹七片、肿节风胶囊、小儿麦枣咀嚼片等，共40余个品种，涵盖片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂及口服液等多种剂型。样品均来自国内知名生产厂家，采集时间为2024年5月至2025年5月，每个品种采集量为7～24盒(瓶),以确保批次和厂家的代表性。
1.2 实验试剂
原料：白芍、黄柏、陈皮、厚朴、乌药、防风、甘草等中药材均购自北京同仁堂药材公司(中国北京)。
对照品(标准品):芍药苷(≥98%,中国药品生物制品检定所);盐酸小檗碱(≥98%,中国药品生物制品检定所);橙皮苷(≥98%,Sigma-Aldrich, 美国);厚朴酚(≥98%,国家药典委员会标准品);甘草苷(≥98%,中国药品生物制品检定所);甘草酸单铵盐(≥98%,国家药典委员会标准品)。
化学试剂：甲醇(HPLC级，国药集团化学试剂有限公司，中国上海);氯仿；乙酸乙酯；甲酸；冰醋酸(分析纯，国药集团);硫酸(优级纯，国药集团);香草醛(分析纯，Sigma-Aldrich, 美国);氯化铝(分析纯，Merck, 德国)。
其他材料：D101大孔吸附树脂(天津市化学试剂研究所，中国天津);硅胶GF254预制板(10 cm×20 cm, 青岛海洋化工厂，中国青岛);高效硅胶板(Merck公司，德国)。
1.3 仪器与设备
紫外分析仪(254 nm/365 nm双波段紫外灯，ZF-7D型，北京六一仪器厂，中国北京);恒温水浴锅(HH-S4,±0.1 ℃,江苏金坛实验设备有限公司，中国江苏);超声清洗器(KQ-300VDE,40 kHz, 昆山市超声仪器有限公司，中国江苏);旋转蒸发仪(R-300型，Büchi公司，瑞士);电子分析天平(FA2004B,精度0.1 mg, 上海精密科学仪器有限公司，中国上海)、自动薄层点样仪(Linomat 5,Camag公司，瑞士)。
1.4 实验方法
1.4.1 实验设计
本研究采用对照品对比法，通过薄层色谱技术对42个品种、524盒(瓶)中成药样品进行真伪判定。实验严格按照《中国药典》(2020版)及相关文献方法执行，所有实验均重复3次，以保证稳定性和可靠性。
1.4.2 样品处理与供试品溶液制备
精密称取中成药颗粒或片剂粉末约3 g, 加入甲醇50 mL,超声提取30 min, 冷却后滤过。滤液在水浴中低温蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至1～2 mL。部分辅料复杂的样品经D101大孔树脂分级洗脱(10%、50%、80%、90%甲醇)处理，收集不同极性部分，用于后续分析。
1.4.3 对照品与对照药材溶液制备
对照品精密称取，加甲醇溶解，配制0.5～1.0 mg/mL溶液；对照药材粉末0.1～0.5 g, 加入甲醇5～10 mL,超声处理15 min, 过滤。所有溶液均短期避光保存。
1.4.4 薄层色谱条件
每点样3～5 μL,斑点直径≤4 mm; 展开距离6～8 cm, 展开剂按成分极性差异选择；显色剂包括10%硫酸乙醇溶液、2%香草醛硫酸乙醇溶液、氯化铝乙醇溶液。展开后在105 ℃加热，日光与紫外灯(254 nm/365 nm)下观察，记录Rf值与斑点特征。
1.5 观察指标
供试品与对照品斑点Rf值是否一致；斑点颜色、形态与位置是否符合标准；不同批次间斑点特征一致性；前处理方式对斑点清晰度和干扰峰的改善情况。
1.6 统计学方法
所有实验结果均采用SPSS 26.0统计软件分析。Rf值采用均值±标准差(x¯±s)
(
x
¯
±
s
)
表示，批次差异采用单因素方差分析(ANOVA),P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 总体鉴别情况
本研究共采集42个品种、524盒(瓶)中成药样品，涵盖颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂及口服液/膏剂等多种剂型。结果显示，绝大多数样品在与对照品相同Rf值位置显现特征性斑点，颜色清晰、边界规整，整体符合率为100%,未发现假冒或伪劣产品。本研究表明薄层色谱技术在中成药真伪判定中具有较高的可靠性和稳定性，也反映出目前正规厂家生产的中成药质量总体处于可控水平[5-6]。
2.2 不同剂型的表现
颗粒剂(15种，共220盒):如寒喘祖帕颗粒、风寒咳嗽颗粒、齿痛消炎灵颗粒、感冒清热颗粒、小儿七星茶颗粒、小儿豉翘清热颗粒、小儿肺热咳喘颗粒、胃苏颗粒等。斑点Rf值集中在0.30～0.55,不同批号之间差异<0.02,均显现蓝紫色或棕色特征性斑点，判定为真品。
片剂(10种，共160盒):如咽炎片、元胡止痛片、妇康片、风湿骨痛片、尪痹片、肠舒止泻片、丹七片、天麻头痛片等。部分样品因辅料影响，出现斑点拖尾或背景干扰，经D101大孔树脂处理后，干扰峰减少约40%,斑点清晰度提升，Rf值集中在0.25～0.48,最终均判定为真品。
胶囊剂(9种，共150盒):包括金感胶囊、心脑舒通胶囊、消栓通络胶囊、皮肤病血毒丸、芩黄喉症胶囊、保胎灵胶囊、益心酮软胶囊、肿节风胶囊等。特征性斑点Rf值集中在0.28～0.65,不同厂家样品在同一位置均显相同颜色斑点，一致性>98%。
丸剂(6种，共60盒):如脑立清丸、通宣理肺丸、蛤蚧定喘丸、偏瘫复原丸、金匮肾气丸、泻青丸等。部分样品因辅料糖衣或蜂蜜基质使得提取液颜色较深，但经稀释或树脂纯化后，均能在Rf值0.35～0.60范围内显现特征性棕黄色斑点，判定为真品。
口服液/膏剂(2种，共36瓶):如润肺膏、小儿热速清口服液。液体样品经低温浓缩处理后，斑点Rf值范围0.25～0.45,特征性斑点与对照品一致。
2.3 真假鉴定结果
真品表现：所有样品均在与对照品相同Rf值位置显现颜色一致的特征性斑点。例如，寒喘祖帕颗粒、风寒咳嗽颗粒在Rf=0.32～0.40处显蓝紫色斑点；金感胶囊、心脑舒通胶囊在Rf=0.45±0.02处显棕色斑点；脑立清丸、偏瘫复原丸在Rf=0.50±0.03处显棕黄色斑点。
可疑或不合格表现：个别批次的小儿热速清颗粒和润肺膏中，特征性斑点颜色较浅，Rf值较对照品偏低约0.05;部分元胡止痛片存在轻度拖尾。经复检及树脂纯化后，斑点恢复清晰，提示为样品存放或辅料干扰所致，并非假冒或伪劣产品。
假品筛查：在全部42个品种、524盒(瓶)样品中，未发现完全缺失特征斑点或出现异常斑点的情况，未检出假冒或伪劣产品。
2.4 判定统计结果
真品：42个品种、524盒(瓶),整体符合率为100%;存在轻微质量波动(斑点浅淡、拖尾等):约占6%(32盒),经复核均排除假冒或伪劣产品；假品：0盒(未检出)。如表1所示。
表1 中成药真假鉴定结果
|
剂型 |
品种数 |
样品总量 |
Rf值范围 |
真品数 |
可疑样品数 |
假品数 |
|
颗粒剂 |
15 |
220盒 |
0.30～0.55 |
220 |
0 |
0 |
|
片剂 |
10 |
160盒 |
0.25～0.48 |
150 |
10 |
0 |
|
胶囊剂 |
9 |
150盒 |
0.28～0.65 |
147 |
3 |
0 |
|
丸剂 |
6 |
60盒 |
0.35～0.60 |
60 |
0 |
0 |
|
口服液/膏剂 |
2 |
36瓶 |
0.25～0.45 |
34 |
2 |
0 |
|
合计 |
42 |
524 |
— |
524 |
15 |
0 |
3 讨论与结论
从不同剂型的表现来看，颗粒剂如寒喘祖帕颗粒、风寒咳嗽颗粒等，提取液较为清澈，目标成分溶出充分，因而在薄层色谱板上能够显现出清晰、稳定的斑点，批次之间几乎无差异。片剂如元胡止痛片、妇康片等则因辅料中含有淀粉、乳糖等成分，容易在展开过程中造成拖尾或背景干扰，但经过大孔树脂的前处理后，这些非目标成分得以去除，使得特征斑点更加清晰，说明前处理在片剂类制剂中尤为重要。胶囊剂如金感胶囊、消栓通络胶囊等则表现出良好的一致性，虽然胶囊壳在溶解后可能释放少量杂质，但经过适度稀释和过滤即可避免干扰，因此斑点依然能够稳定显现[7]。丸剂如偏瘫复原丸、金匮肾气丸等，由于蜜丸或水蜜丸基质较为厚重，初始提取液颜色较深，容易掩盖目标成分，但通过稀释和树脂纯化后，仍能在预期的Rf值范围内呈现出特征性棕黄色斑点。口服液/膏剂如润肺膏、小儿热速清口服液在低温浓缩后同样能够显示预期的特征斑点，只是部分批次显色较浅，提示成分在长期储存过程中可能发生降解[8-9]。
在产品真假判定环节，本研究未发现典型的假冒样品，但确实存在一些“可疑”的结果，若仅仅凭借单次的薄层色谱观察，很容易误判成成分缺失或者不合格[10]。但是经过复检以及大孔树脂纯化之后，斑点重新显现或者恢复到清晰的状态，其本质上依旧是真品，只是受到储存条件、辅料干扰或者部分成分降解的影响，在实际应用中需特别留意。薄层色谱鉴别技术可快速发现潜在的问题，还可凭借重复检测以及方法优化对可疑结果进行澄清，避免误判[11]。另外，本研究结果也从侧面证实了方法学的稳定性，不同厂家生产的同一品种在不同批号中都可得到相同的特征斑点，Rf值差异控制在±0.02范围以内，重复性较高，经过固相萃取预处理之后，背景杂峰减少了约40%,斑点的对比度以及清晰度明显提高，优化后的薄层色谱方法对复杂制剂有着较强的适应性。
综上所述，薄层色谱鉴别技术在中成药真伪判定方面有着灵敏度高、特异性强、直观性好、操作简便等优势，可有效地发现可疑或者质量波动的样品，并且经过复核排除假冒或伪劣产品，验证了其在中成药质量控制以及临床用药安全中的关键价值。
发布时间：2025-12-18 
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