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薄层色谱技术在中药检验中的应用价值分析

发布时间:2025-12-18

     薄层色谱法的定义用保留值定型在特定的色谱系统中,化合物的比移值(Rf值)是常数。将未知物质的Rf值与标准物质的Rf值进行比较,可以作为鉴定未知物质的依据。通过显色等方法进行定性分析和定位后,测量斑点的Rf值。与同一块板上已知参考点的Rf值比较,Rf值一致,可以初步确定该点参考点是同一物质。然后更换几个展开系统,如果Rf值还是一样,可以得到更为积极的定性结论。而薄层色谱技术在中药检验方面,通常用于分离混合物,从而定性与定量分析混合样品,同时也能进行鉴定。薄层色谱技术在各类实验中皆能发挥出显著的价值,该技术从柱色谱和纸色谱发展而来,作为开放式的色谱,具备直观性、灵活性与时效性的特点,并且操作简便,能同时分离多个样品,同时药品预处理程度低,在中医的临床检验中应用广泛,在中药成分的鉴定上发挥了重要的作用[1]。分类薄层层析针对各种各样的固定相支持物,能够选择对应的层析方法来进行适用,来与固定相支持物良好的匹配。而伴随近几年国内科学研究获得了的成果,薄层色谱技术上也取得了阶段性的突破,不仅在检验的效率上得到了提升,也使得各种误差情况得到了控制,但要为进一步保证中药检验的整体质量,还需要对薄层色谱技术的应用进行研究,来为临床治疗提供技术上的支撑。
 
1 薄层色谱技术的概念及原理
薄层色谱技术通常是指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法,目前多用于中药成分的分析,除此之外还能鉴定中药的品质,在中药检验上占据十分重要的地位。薄层色谱技术的实施较为简便,同时其局部鉴定与分离的两种功效,解决了许多其它分离分析方法无法解决的问题[2]。由于诸多因素,色谱条件的一致性很难控制。例如,样品量的准确性、显影后斑点面积的规律性和测量方法的准确性等,使薄层色谱定量分析处于“半定量”或有限检查阶段。而在科学技术更加先进的当下,薄层色谱技术还能运用薄层扫描仪来开展,对中药的成分进行更加高效的检验。用薄层扫描仪等仪器直接测定定量含量更准确,也可将斑点分离后洗脱,再用紫外-可见分光光度法、气相色谱法等仪器定量。并且随着中药研制薄层色谱技术的大量应用,发展出了不同的薄层色谱法,包括高效薄层色谱法、反相薄层色谱法、微乳薄层色谱法以及假相薄层色谱法等,为各类中药检验提供了技术支持,帮助对中药成分进行准确的分析和检测。薄层扫描在临床上具有清晰度高、易发现小病变等优点,而在中药检验方面通过借助适合波长的光照射薄层板,其能够对图谱进行色谱法的定量扫描,来发挥作用。其中薄层扫描仪属于一种直接扫描斑点以满足薄层色谱要求的分光光度计。
 
2 薄层色谱技术在中药检验中的应用
2.1 高效薄层色谱法
高效薄层色谱法能够分离样品混合物中的化合物,借助颗粒较细的吸附剂,以喷雾法的方式来完成中药检验,具备涂层均匀、重现性好等优点。目前高效薄层色谱法的应用主要是以自动或半自动进行,相比常规薄层色谱法,更能够实现正相色谱分离与反相薄层色谱分离。除此之外,还能对中药进行定性、定量分析,直观灵活且快速可靠[3]。在中药药物的分析和中药材料的分离时,高效薄层色谱法分离中药时能借助更均匀、细的硅胶和纤维素,最终达到让色谱选择多样化的目的。与此同时,高效薄层色谱法的检测耗时短,因此对于中药检验效率更高,在临床应用方面有很大的优势,对于中药质量控制起到了十分重要的作用。
 
2.2 反相薄层色谱法
薄层色谱法的定义用保留值定型在特定的色谱系统中,化合物的Rf值是常数。其原理主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同(分配作用)而实现分离的液相色谱分离模式,并且可按照样品性质配合合适的固定相材料,从而保证具体的分离作用,能够重复使用,能够用于多种样品。反相薄层色谱法的流动性通常会大于固定相的极性,可用于极性、极性化合物的分离,甚至水溶性化合物的分离,在复合性的中药分离上,能够发挥良好的效果。反相薄层色谱法常用展开剂是水和甲醇混合溶剂,能够为分离提供更多的可能性和选择性,按照中药的特性,选择合适的展开剂,来检测中药的成分。反向薄层色谱法的回收率高、重现性好,同时其薄板可循环利用,通过展开剂检测中药中的成分,对各成分起到十分理想的鉴定作用[4]。
 
2.3 微乳薄层色谱法
微乳薄层色谱法是以微乳液为流动相的薄层色谱法,其属于经典的薄层色谱法之一,微乳体系的组成与胶束体系相似,通过搭配不同的稳定体系和展开剂,更有利于提高色谱效率。微乳薄层色谱法对天然药物的化学成分具有分离效果好、灵敏度高,同时展开效果好、色谱性能稳定,对于黄芩等药材的分离与鉴定方面,能够起到良好的效果。虽然在微乳薄层层析过程中,会受到各种外部因素的影响,但仍然对中药检验具备灵敏度,并且能同时分离亲水物质和疏水物质,在中药成分的测定中,适用于分离差别很小的物质,最常见的如双黄连口服药成分的鉴定方面[5]。
 
2.4 假相薄层色谱法
假相薄层色谱法的流动相主要为低浓度的表面活性剂,其固定相通常为聚酰胺薄膜,其表面活性剂能与不同溶剂制成塑胶溶液,对中药进行选择性的溶解。在中药检验中,假相薄层色谱法具备流动简单、价格低廉的特点,针对不溶于水的中药,能够发挥出现良好的分离作用,同时还能用于检测中药中的杂质。除此之外,对于中药治疗的患者,借助假相薄层色谱法,还能对其体内的药物成分进行测定,来对其中药起到的作用做出评估,对于患者疗效和预后的判定起到了重要的作用,在临床实践中应用也十分广泛[6]。而根据临床相关研究证实,采用假相薄层色谱法,其中药检验的整体效率和检测质量都较为理想。
 
3 薄层色谱新技术的应用
3.1 仪器与材料方面的支持
薄层色谱技术的应用上,仪器与材料有着密不可分的联系,主要包括了支持物、固定相、点样器、展开容器、显色器以及检视器等。其中支持物有玻璃板、塑料板等,而固定相有硅胶、聚酰胺等。而点样器需根据具体需求来选用合适的微升毛细管、展开容器,来提高中药检验的整体质量,最大程度减少误差与失误情况的出现[7]。显色器有玻璃喷雾、空气压缩机等,检视器一般是暗箱和摄影设备。薄层色谱技术能够对中药的中草药成分和中草药元素进行检测,而且各单元方面的操作各自独立,因此得出的检测结果会更为准确,且具备灵敏度。
 
3.2操作要点及常见问题
薄层色谱技术的应用过程中,需要选择对应的标准物质与薄层板,同时根据不同的中药来制备其中草药检测品。在选择标准物质方面,应具备对照品和对照药材,而中药的种类繁多,存在部分中草药的共存植物较多,而不具备专属性的物质,导致单纯使用对照品来完成分离纯化,会浪费较多的成本,影响中药检验的整体结果。因此在选择供试品过程,应结合对照药材,做好相应的分析和鉴定工作,搭配溶剂提取法,以正确的提取溶剂,帮助提取多种药材或处方药[8]。而若中药的成分过于复杂,则还应使用多种提取法,以免影响提取的效果。在选择薄层板过程,虽然临床上应用最多的为硅胶,但中药检验中因中草药检测品的酸碱性存在差异,必须充分结合氧化铝与聚酰胺。应根据具体的样品来选择点样机,同时配合对应的毛细管,对供试品溶液等进行获取,操作时需要严格根据各环节的要求,药材对照方面应尽可能严谨,制备方法需要保证合理性,从而避免产生误差而影响薄层色谱技术的应用效果。对于展开对同一种样品,同样条件下,若展开剂中极性大的溶剂比例大,则Rf值大,若展开剂中极性大的溶剂比例小,则Rf值小,因此需事先评估中药的具体成分,根据鉴定的结果来筛选对应的展开缸。而对于不同成分的性质,在操作前应挑选合理的显色方式。除此之外,供试品溶液所显主斑点应与对照主斑点相对应。特征斑点应选择已知有效成分或特征成分的斑点。如有效成分未知或无法检出,可选择未知成分的特征斑点,但要重现性好,斑点特征明显。最后在中药测定期间,为保证薄层色谱新技术发挥的温度,应适当调整室内的温度、湿度以及光照,防止外部因素对中药检验造成影响,对操作进行严格的管理,需根据具体的流程来完成各个环节的步骤,从而确保色谱检测的整体效果。
 
4 结语
由于薄层色谱技术具备实施简便、显色方便的特点,在中药检验中的应用十分广泛,是目前最常用的中药鉴别技术之一,而随着科学技术的不断进步,薄层色谱技术还有很大的上升空间,现下对于中药的检验上,该技术仍然存在诸如精确度不足等问题,且对于中药成分的鉴定方面,会因仪器设备精密度的提高,其应用效果会更好,研究证实薄层色谱技术拥有良好的发展前景。

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