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分析方法

中药房探讨高效液相色谱法在中药真伪鉴别中的应用

时间:2021-02-03 12:02:29 作者:admin 点击:

 
 
       中药作为中华民族瑰宝,是与疾病战斗的武器,在疾病治疗中具有积极作用,因此中药的真伪对患者治疗效果至关重要[1]。在临床治疗中若使用伪品,将会延误治疗时机从而导致病情恶化[2]。现阶段,有很多方法可以鉴别中药的真伪,每种方法的操作不同,针对的中药以及范围不同,操作复杂。同时,因中药种类多,在真伪鉴别过程中有许多复杂性因素存在,中药指纹图谱、性状鉴别、高效液相色谱法等都可以有效辨别中药的真伪[3]。为探讨高效液相色谱法在中药真伪鉴别中的应用,此次研究将选择常州市武进中医医院2016年11月-2018年11月购置的当归、人参黄芪等共44份作为研讨对象并对其进行鉴别,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
 
选择南京中医药大学附属常州市武进中医医院2016年11月-2018年11月购置的当归、人参黄芪等共44份作为研讨对象并对其进行鉴别,通过随机分配法把患者分为两组,其中将通过性状鉴别的一组作为对照组,将通过高效液相色谱法鉴别的一组作为观察组。
1.2 方法
 
将通过性状鉴别的一组作为对照组,利用味觉、触觉、视觉、嗅觉等方式对当归、人参黄芪进行常规的性状鉴别,观察药物的形状、质地、气味等[4]。将通过高效液相色谱法鉴别的一组作为观察组,根据《中华人民共和国药典》[5]对当归、人参黄芪利用高压液相色谱[上海精科,LC-210(单泵)]鉴别,在使用前进行污染物清理,同时,本次研究试剂全部是化学纯。将1 g当归,采用浸泡法和索氏提取法,选择20 m L乙醚提取液、乙醇提取粉末溶解液,利用浸泡法进行超声提取。将1 g人参利用三氯甲烷提取液、5 m L甲醇提取粉末溶解液、水和正丁醇50 m L分离液进行索氏提取;将3 g黄芪选择20 m L甲醇提取液,甲醇5 m L提取粉末溶解液用中性氧化铝柱分离,利用煎煮法进行索氏提取。
 
高效液相色谱参数设定:在使用前校正高效液相色谱的准确度。同时对当归、人参黄芪等药材采用Agilent色谱柱,流动相为0.05%醋酸乙腈溶液,流速为1 m L/min;除此之外,人参的柱温为28℃,波长203 mm;黄芪的柱温为25℃,波长254 mm;当归的柱温为25℃,波长275 mm。
1.3 观察指标
 
比较两组药物包括当归、人参、黄芪等的鉴别结果。比较医务人员对药物鉴别的满意度,采用自制调查表,将满意度的总分设定为100分,如果高于80分,则表示医务人员对鉴别结果感到非常满意,如果分数在60~80,则表示医务人员对鉴别结果感到一般满意,如果低于60分,则表示医务人员对鉴别结果感到不满意,疗效总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。
1.4 真伪鉴别评判
 
按照与标准对照品对样品特征吸收峰和保留时间进行观察,以此对药物真伪进行判断,保留时间大于5%则为伪品。
1.5 统计学方法
 
数据采用统计产品与服务解决方案(Statistical Product and Service Solutions,SPSS)22.0统计学软件统计处理,计量资料、计数资料分别用t检验和χ2检验,并分别用,[例(%)]表示,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 比较两组药物的鉴别结果
 
鉴别后发现对照组中的当归、人参、黄芪等药物的伪品率(11.36%)远低于观察组药物的伪品率(54.55%);差异显著具有统计学意义(P<0.05)。并且还发现当归的伪品是东当归,人参的伪品是三七,黄芪的伪品是甘草。见表1。
 
表1 比较两组药物的鉴别结果[例(%)]
2.2 比较医务人员对药物鉴别的满意度
 
在对药物样品实施检测鉴别之后,医务人员对观察组的满意度(93.18%)高于对对照组的满意度(65.91%),差异明显(P<0.05),有统计学意义。见表2。
 
表2 比较医务人员对药物鉴别的满意度[例(%)]
3 讨论
 
中药是中国传统药物的总称,因中药种类繁多,再加上植物药物在性状上具有较高的相似性,使部分人员在售卖的中药里掺杂伪品[6]。中药真伪鉴别是保证患者疗效的基石,过去在鉴别中药真假时最常使用的方法为性状鉴别法,该种检验方法的准确率与检验人员的水平有关,不具稳定性,在大批量药物检验作用较大,方便快捷。患者服用伪劣中药极易错过最佳治疗时机,使病情加重;为避免患者使用以次充好的中药材,需要寻找到一种准确、有效且科学的鉴别方法具有重要的意义[7]。
 
鉴别方法的好坏不仅体现在鉴别的准确度,重复操作也十分重要。高效液相色谱具有高压、高效、高灵敏度、范围广、速度快等优势,在鉴别中药真伪上,其检验结果的准确性较高,并且将经鉴别出来的伪品与常见伪品相比,能够准确显示结果[8]。高效液相色谱鉴别法与中药指纹图谱方法需要联合使用,每一种药物都具备特征峰,中药的特异性是高效液相色谱鉴别真伪的基础。此次研究中发现当归的伪品为东当归,两种中药的相似程度高,但普遍认为东当归的质量比当归要低,这是因为当归的挥发油成分比东当归高,且差异显著,因此可以采取浸泡法提取当归中的有效成分,鉴别这两种中药的方法是阿魏酸的含量高低,阿魏酸含量高的药物为当归,阿魏酸含量低的药物是东当归。人参的伪品为三七,人参与三七都是五加科植物,而在药物效果方面却是天差地别,人参主要作用在于补气,但三七主要作用是止血,若患者将三七作为人参使用,不利于疾病康复,利用高效液相色谱进行鉴别法可以将三七与人参鉴别出来。黄芪的伪品为甘草,这两种药物的皂苷含量有较大的差异,用甘草作为黄芪使用,无疑对治疗效果有影响,因黄芪与甘草均属蝶形花科,仅采用性状鉴别法不能有效区分,可以通过有效成分在指纹图谱上的差异对黄芪与甘草进行鉴别。
 
本研究结果显示,鉴别后发现性状鉴别下的当归伪品率4.55%、人参伪品率2.27%、黄芪伪品率4.55%等药物以及其总伪品率(11.36%)远低于通过高效液相色谱法鉴别下的当归伪品率(18.18%)、人参伪品率15.91%、黄芪伪品率20.45%等药物及其总伪品率54.55%;差异有统计学意义(P<0.05),有统计学意义。并且还发现当归的伪品是东当归,人参的伪品是三七,黄芪的伪品是甘草。在对药物样品实施检测鉴别之后,医务人员对高效液相色谱法鉴别的满意度(93.18%)高于对性状鉴别的满意度(65.91%),差异明显有统计学意义(P<0.05)。
 
综上所述,与性状鉴别相比较,通过高效液相色谱法鉴别当归、人参以及黄芪等中药的真伪,效果显著,准确率高,能提高医务人员的满意度,具有较好的临床鉴别价值。
 
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